来游戏武汉麻将 蜂毒肽的组织、功能及分子生物学钻研挺进
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来游戏武汉麻将 蜂毒肽的组织、功能及分子生物学钻研挺进

来源:http://www.teoandsons.com 作者:啪啪三张牌 时间:2019-12-10 点击: 171

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蜂毒肽的构象始末X-射线晶体衍射不益看察呈螺旋-曲曲-螺旋组织,曲曲部位于第11~15氨基酸残基,1~10残基与16~26残基形成的二螺旋的轴线间的交角约为120°。

蜂毒肽可诱导大鼠神经角质瘤C6细胞HSP27和HSP70的外达[10],HSPs是CN8 T细胞答答诱导辅助分子[ 11],参与抗肿瘤T细胞答答,有看成为抗肿瘤T细胞免疫疗法的靶分子[12]。

王关林等[19] (2000)从蜜蜂毒腺中挑取总RNA,始末RT-PCR 手段扩添得到了蜂毒肽前体蛋白的cDNA,再进一步始末定点诱变在蜂毒肽序列前引入了羟胺裂解位点,构建了与β-半乳糖苷酶片面序列相融相符的蜂毒肽诱变蛋白外达载体,序列分析效果外明,成功地引入了方针暗号子,且与β-半乳糖苷酶片面序列构成切确的读码框,并在大肠杆菌中外达了诱变蛋白。

1.蜂毒肽的抗菌作用

蜂毒肽 (melittin)亦称蜂毒溶血肽,是一栽昆虫抗菌肽 , 是意大利蜂蜂毒的主要成分之一,占蜂毒干重的50%,是蜂毒中的主要多肽成分,不光具有抗菌、消热、抗关节热等作用,对辐射还有预防和治疗作用,可使受辐射动物的生存率挑高20%~60%[1]。

3.蜂毒肽的抗肿瘤作用

陈仲兵等[18] (1998)在上述做事基础上来游戏武汉麻将,别离蜂毒肽基因,并将它克隆到大肠杆菌中。

总之,蜂毒肽具有对肿瘤细胞的选择性杀灭作用 , 又具有相对分子质量幼、热安详性、无免疫原性等特点,极有能够成为无(矮)毒副作用的抗肿瘤新药。

2001年王关林等[20]克隆了蜂毒肽前体蛋白的cDNA , 并在大肠杆菌中外达了与β-半乳糖苷酶片面序列相融相符的蜂毒肽前体蛋白。

现在,人们主要始末从蜜蜂毒液中别离挑取或化学相符成来获得蜂毒肽。但由于磷脂酶A2的存在而造成的纯化难得和蛋白质化学相符成的高成本,使蜂毒肽的普及行使受到了节制。

从氨基-首先首前20个残基中只有7位的K残基带电荷,此片面呈高度流水性。相背,羧基-首先的6个氨基酸残基片面是高度阳离子化,有2个K残基,两个R残基,两个Q残基;氨基-首先的螺旋则是兼性的[2] 。

蜂毒肽在水中存在2栽形势,即在矮浓度、矮离子强度形成单体的解放组织;在高浓度、高离子强度则形成四聚体。

蜂毒肽由26个氨基酸残基构成,是由蜜蜂毒腺中相符成的蜂毒肽前体蛋白 (promelittin)经二肽蛋白酶水解而成的,其相对分子质量为2 849,氨基酸的排列挨次为:甘-异亮-甘-丙-缬-亮-赖-缬-亮-苏-苏-甘-亮-脯-丙-亮-异亮-丝-色-异亮-赖-精-赖-精-谷-谷,具有强碱性,pH10,溶于水。

中国农科院蜜蜂钻研所,北京 100093

Juvvadi[3]始末对天蚕素A和蜂毒肽杂相符体的抗菌作用钻研,推想其抗菌作用最先是抗菌肽的阳离子与膜上磷脂基团的阴离子之间的相互作用,继而是与膜上的碳氢化相符物的相互作用,然后肽分子的疏水α-螺旋插入膜上,聚相符成孔道,导致内容物外泻,细菌物化亡。

二、蜂毒肽的功能

蜂毒肽具有膜活性,直接对细胞的磷脂膜首消融作用,按捺细胞发育,对肿瘤细胞(淋巴瘤、肉瘤)有凶猛的细胞毒素作用。蜂毒肽抗肿瘤的作用机制多说纷纭,Saint[6]发现蜂毒肽裂解人单核细胞性白血病细胞U937是始末激活内源性磷脂酶D而致。

蜂毒肽具有广谱杀菌作用,能按捺革兰氏阴性和革兰氏阳性病原微生物的发育,尤其对耐药菌株有清晰抑杀作用。

2.蜂毒肽的抗艾滋病毒作用

该物质为蜂毒肽的前体,比蜂毒肽多8个氨基酸,用二肽蛋白酶IV能够裂解Promelittin,从而开释蜂毒肽[16] 。

转载于天之力医药

而生物工程技术的发展为生产蜂毒肽挑供了一条新的途径。始末基因工程的手段获得蜂毒肽的尝试,已取得必定挺进,但这只是一个首步,距离大周围生产还有很长一段路。如何进一步挑高外达程度,挑高基因外达产物的安详性等,都是值得深入钻研的题目。

也有人认为蜂毒肽优先激活ras癌基因转化细胞的PLA2,致其选择性损坏[13]。

(本论文刊载于:蜜蜂杂志(月刊)2002年第8期)

展开全文

李继周等[17]于1997年始末mRNA ※cDNA 反转录的手段, 相符成了蜂毒肽基因,并将其克隆到外达载体λgt11上,竖立了蜂毒肽cDNA文库,行使抗体探针筛选出能够外达蜂毒肽的阳性克隆,经用PCR扩添和产物免疫响答进走检测,表明蜂毒肽的cDNA克隆成功,并得到外达。

蜂毒素始末增补Ca2 内流高度激活ras转化细胞的PLA2,选择按捺其ras蛋白外达程度安ras基因的拷贝数,同时使其向平常形态反转。

抗菌肽是天资性免疫的效答器,使宿主对寄生物敏捷产生非特异性的招架力。蜂毒肽以剂量倚赖手段缩短不息感染人类免疫弱点病毒1(HIV-1)的T淋巴瘤细胞HIV-1产物的量。蜂毒肽始末其胞内作用减幼病毒感染性。蜂毒肽被摄入胞内,使gag/pol前体的添工被减弱[4] 。

Vlasak等[14](1983)用Kindas-Mugge等的手段,别离并挑纯了蜂毒肽rnRNA,又用mRNA※cD-NA反转录手段,相符成了蜂毒肽的cDNA,然后将相符成的双键cDNA克隆到pBR322和pUC8质粒上,转化大肠杆菌。

三、蜂毒肽的基因工程

2001年王秋波等[21] 报道始末人造相符成含特异性酶切位点的AB两条寡核苷酸片段,在Klenow酶作用下形成方针基因, 用节制性内切酶Hind III,Xmn I同时酶切方针基因和外达载体Pmalp2质粒,在T4连接酶的作用下构建两者的重组体 , 始末α-互补筛选出阳性克隆,并始末特异性酶切和测序分析进走判定,获得重组蜂毒肽的原核外达克隆。

作者:孙丽萍 董捷 闫继红 王凤忠 吴粹文

张青文等[15]从1991年最先别离挑取了蜂毒的rnRNA,并将纯化后的蜂毒肽rnRNA注入棉铃虫卵中进走转译,成功地相符成了Promelittin。

Wachinger[5]1998年报道的钻研效果外明,蜂毒素和天蚕素能够在亚毒性浓度下按捺艾滋病毒HIV-1的基因外达,从而缩短HIV-1的添殖。这栽按捺作用,对于细胞游离病毒有剂量倚赖性。对于细胞说相符病毒的钻研发现,蜂毒素可使Gag抗原和HIV-1mRNA缩短,蜂毒素和天蚕素能够按捺HIV LTR(HIV long terminal repeat)的活性。这外明蜂毒素对于当今人类的顽症 ——艾滋病有按捺作用。

近年来发现其具有抗肿瘤、抗艾滋病毒的作用,引首了人们的极大关注。

一、蜂毒肽的组织

Arora[7]表明蜂毒素激活磷脂酶A2(PLA2),消弭肝癌细胞对缺氧的招架。Kubo[8]发现蜂毒肽可杀伤K562和HL-60细胞,蜂毒素插入K562细胞的胞膜中形成孔道,引首Ca2 内流,胞内Ca2 浓度提高,细胞裂解[9]。

原标题:蜂毒肽的组织、功能及分子生物学钻研挺进

蜂毒肽 (meittin)由26个氨基酸残基构成,但它不是rnRNA直接外达的产物。最初rnRNA翻译产物是Pre -Promelittin有70个氨基酸,蜂毒肽(meittin)位于COOH一端(第44-69),N一端最先于疏水的“pre”区,共21个残基,接下来是独物的“Pro”区,只含有Ala、Pro及酸性残基。Pre-promelittin需经过三步翻译后的添工过程,才能终极形成蜂毒肽 (meittin)[18] 。

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中国网11月29日讯 由中国城市科学研究会历史文化名城委员会、中国城市规划学会历史文化名城学术委员会和周庄镇人民政府共同主办的“2019中国名镇(周庄)论坛”定于2019年11月30日-12月1日在周庄古镇举办。本届论坛将以“古镇新空间”为主题,结合当下精致古镇建设和“夜经济”发展契机,探讨古镇人居、产业、文化、生活等新空间与旅游体验创新融合,旨在推动论坛向总结、提炼和宣传古镇保护与利用模式为核心的创意论坛升级,搭建发展古镇保护模式的智库和重要交流平台,助推主客共享新空间构建和古镇可持续发展。

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